一种绿壳蛋鸡的养殖方法与流程

本发明涉及养殖技术领域,尤其涉及一种绿壳蛋鸡的养殖方法。

背景技术:

绿壳蛋鸡,因产绿壳蛋而得名,其特征是所产蛋的外壳颜色呈绿色,是中国特有禽种,被农业部列为“全国特种资源保护项目”。该鸡种抗病力强,适应性广,喜食青草菜叶,饲养管理、防疫灭病和普通家鸡没有区别。

绿壳蛋鸡体形较小,结实紧凑,行动敏捷,匀称秀丽,性成熟较早,产蛋量较高。成年公鸡体重3.2~4.5市斤,母鸡体重1.9~3.1市斤,年产蛋160~180枚。该鸡种具有明显高于普通家鸡抗御环境变化的能力,南北均可养殖。

技术实现要素:

为了实现上述发明目的,本发明采用的技术方案如下:

一种绿壳蛋鸡的养殖方法,按照如下步骤操作:

对于在2-3周龄的绿壳蛋鸡,按照如下质量百分数计的原料配置得到的饲料进行饲喂,3次/天,且每次100-300g/只,且由其自由采食至吃饱为止;

所述饲料的组成如下:玉米粉45-55%、植物提取物混合料5-10%、贝壳粉8-15%、豆粕10-15%、发酵蛋壳料5-10%、鱼粉3-5%、食盐1-3%、磷酸氢钙2-4%;

所述发酵蛋壳料是将废弃蛋壳进行粉碎后,加入婆美度为30-45的红糖水后发酵10-20天即可;

所述植物提取物混合料按照重量百分数计由以下原料制成:苦丁茶提取物15-20%、紫藤提取物8-15%、麦冬提取物10-18%、乌韭提取物10-15%、桑果提取物4-9%、菊苣提取物5-13%、越桔提取物7-12%、绞股蓝提取物7-12%、侧柏叶提取物3-10%、毛木耳提取物3-5%;

所述植物提取物混合料的制备方法为:将上述的提取物按照重量百分数计混合后加入总重量的10-30%水混合成粘稠物后,加入甜味剂、羟甲基纤维素,甜味剂:羟甲基纤维素:粘稠物按照重量份数比为0.15-0.23:0.55-0.65:10-12搅拌均匀后,放入干燥机进行干燥,烘干的同时使用功率为50-80w、频率为30-50赫兹超声波进行改性处理,即可得到粉状植物提取物混合料。

进一步说明,所述苦丁茶提取物将新鲜苦丁茶加入5-10倍体积的水后进行熬煮30-40分钟,趁热进行过滤,取滤液,将滤液的进行加热浓缩至原体积的1.02倍后停止加热,得到浸膏接着加入纤维素酶、70-80%(v/v)乙醇溶液进行索氏提取1-2小时,过滤后将滤液进行减压干燥、粉碎后即可得到苦丁茶提取物,含香树精1.35-2.64mg/g、羽扇豆醇1.02-2.64mg/g、β-谷甾醇2.63-5.24mg/g、苦味质皂苷1.25-2.64mg/g;所述浸膏:纤维素酶:乙醇溶液的重量比为5-10:1-2:21-31。

进一步说明,所述紫藤提取物将1kg紫藤种子进行粉碎后,投入超临界co2萃取装置中,萃取3-4小时,收集提取液,将滤渣加入滤渣质量3-5倍的70-80%(v/v)乙醇溶液,进行回流提取20-30分钟,回流的温度为65-85℃下,接着以0.1-0.2m/s的流速倒入0.3μm陶瓷膜组件进行微滤,在0.1-0.2mpa压力差下,依次用截留分子量10000da、5000da的膜组件,以错流方式进行循环超滤处理,得到分子量范围为5000da-6000da的紫藤提取物,含双丙酮醇0.36-0.56mg/g、β-谷甾醇0.48-1.12mg/g、β-胡萝卜苷0.15-0.23mg/g、星鱼甾醇0.11-0.24mg/g。

进一步说明,所述麦冬提取物是将麦冬经过研磨成粉后加入粉末重量3-5倍的60-80%(v/v)乙醇溶液进行回流提取3次,每次20分钟,过滤后放置蒸发皿中水浴蒸干,接着进行减压干燥至原体积的1.01倍,加入含有1-2%乙酸溶液的70-80%(v/v)乙醇溶液进行定容后,以流速为0.1-0.2m/s的速度进行孔径为0.5-0.8μm的微孔滤膜进行过滤,即可得到麦冬提取物,含麦冬皂苷2.02-4.36mg/g。

进一步说明,所述乌韭提取物将新鲜乌韭全草除杂后加入3-5倍体积的蒸馏水进行均质打浆,接着加入溶媒进行提取1-3小时,接着进行微滤截留分子量为1000-2000da的活性物质,将截留液在转速为2000-3000r/min的分离机中进行分离3-5分钟,取上清液喷雾干燥后即可得到乌韭提取物,得到的物质中含有β-谷甾醇1.62mg/g-4.32mg/g、糖苷1.58mg/g-4.30mg/g。

进一步说明,所述桑果提取物将桑果全草加入2-3倍体积的水于搅拌机中进行搅拌成浆,接着加入3-5倍水搅拌均匀后进行水浴提取30-60分钟,过滤得到粗液,将粗液以0.1-0.2m/s的流速倒入聚酰胺层析柱经常层析,使用70-80%(v/v)乙醇溶液进行3次洗脱,洗脱的压力依次为-0.1mpa、0.1mpa、0.2mpa、洗脱的温度为60-70℃,接着进行过滤,减压浓缩、干燥、粉碎后得到桑果提取物,含鞣酸1.13-2.35mg/g、花青素2.31-3.24mg/g。

进一步说明,所述菊苣提取物将菊苣的花捣碎后加入5-10倍体积的水进行水浴提取20-30分钟,提取过程使用频率为200-300赫兹的微波进行辅助提取,过滤后进行减压浓缩至原体积的1.02倍即可,加入20-30%(v/v)甲醇溶液进行3次洗脱,洗脱的压力依次为-0.1mpa、0.1mpa、0.2mpa、洗脱的温度为60-70℃,接着进行三层纱布过滤、减压浓缩后得到菊苣提取物,含生物碱5.10-8.25mg/g。

进一步说明,所述越桔提取物将越桔放入搅拌机进行搅拌粉碎,接着使用65-75%(v/v)乙醇溶液于温度为-5--3℃下进行醇提过夜,隔夜后采用转速为300-400r/min的离心机进行离心分离过滤得到粗液,将粗液与蛋白酶混合后常温提取1-3小时,过滤得到越桔提取物,含花色苷0.69-2.15mg/g、熊果苷0.69-1.36mg/g;

进一步说明,所述侧柏叶提取物将侧柏叶进行粉碎后得到加入70-80%(v/v)乙醇溶液进行循环提取得到提取液,将提取液加入盐酸调节ph为2.0-3.0,接着边搅拌边水浴加热直至提取液中出现丝状物开始计时继续搅拌5-10分钟,及时过滤取滤液,滤渣重复上述提取步骤2次,将3次的滤液合并进行减压干燥、粉碎后即可得到侧柏叶提取物,含有黄酮0.69-2.01mg/g、萜类物质0.74-1.96mg/g、鞣质0.65-1.25mg/g;

所述毛木耳提取物将毛木耳进行干燥后,加入5-10倍体积的70-80%(v/v)乙醇溶液使用索氏提取器后进行索氏提取2-3小时,过滤取滤液加入滤液总质量的0.01-0.02%的壳聚糖溶液后搅拌直至滤液澄清,过滤去滤液进行加热浓缩,冷冻干燥即可得到毛木耳提取物,含毛木耳多糖115.26-157.36mg/g。

进一步说明,所述甜味剂为木糖醇或低聚异麦芽糖。

综上所述,由于采用了上述技术方案,本发明的有益效果是:

本发明玉米粉、贝壳粉、豆粕、发酵蛋壳料、鱼粉、食盐、磷酸氢钙、植物提取物混合料经过配比后达到了含有有机质58.12-69.75%、微量元素5.96-8.32%,有效碳35.65-38.32%、有效钙15.63-14.65%能满足绿壳蛋鸡生长所需的营养元素,促进生长,并且所添加了植物提取物混合料中富含大量的黄酮类物质、生物碱、挥发油皂苷类物质、鞣质类物质,共同作用起到杀虫、抗微生物菌群滋生的现象使得绿壳蛋鸡在自由采食其他植物后具有更好的抵抗能力,并通过自由采食增加绿壳蛋鸡的运动量,增强体质降低生病率,适量运动辅助降低油脂堆积使得肉质鲜美而不油腻,且添加的植物提取物混合料具有很好的降血脂作用的作用,提高了绿壳蛋鸡的存活率。

各个植物提取物混合料的功效:苦丁茶,叶片革质。完整而平直,呈长椭圆形,叶缘有疏尖锯齿如刺状,叶面光滑,青黄色或青灰色;叶背颜色稍浅,主脉、网脉均明显。性寒,味苦、甘。归肝经、肺经、胃经。疏风清热、除烦止咳、消食化痰。紫藤,味甘、苦,性微温,小毒。归肾经。用于水癊病,浮肿,关节疼痛,肠寄生虫病。败酱草,性凉,味辛、苦。归胃经、大肠经、肝经。清热解毒、祛瘀排脓。桑果性寒,味甘、酸。归心经、肝经、肾经。补血滋阴、生津润燥。菊苣,性凉,味微苦、咸。清肝利胆、健胃消食、利尿消肿。越桔,味酸、甘,平。用于止痢。用于肠炎,痢疾。侧柏叶,凉血止血、乌须发、止咳喘的功效。毛木耳,性甘,味平,肺、肾、肝三经。补气血,润肺,止血。用于气虚血亏,四肢搐搦,肺虚咳嗽,咯血,吐血,衄血,崩漏,高血压病,便秘。麦冬,性微寒,味甘、微苦。归心经、肺经、胃经。用治肺燥干咳、吐血、肺痈、虚劳烦热、消渴、热病津伤、咽干口燥、便秘等。乌韭微苦,寒;清火,退热,利湿,止血。10种植物提取物混合料相辅相成,能降低胆固醇含量,从而预防多种由胆固醇引起的并发症状,起到很好的降低绿壳蛋鸡生病率的效果。

具体实施方式

本说明书中公开的所有特征,或公开的所有方法或过程中的步骤,除了互相排斥的特征和/或步骤以外,均可以以任何方式组合。本说明书(包括任何附加权利要求、摘要)中公开的任一特征,除非特别叙述,均可被其他等效或具有类似目的的替代特征加以替换。即,除非特别叙述,每个特征只是一系列等效或类似特征中的一个例子而已。

实施例1

对于在2周龄的绿壳蛋鸡,按照如下质量百分数计的原料配置得到的饲料进行饲喂,3次/天,且每次100g/只,且由其自由采食至吃饱为止;

所述饲料的组成如下:所述饲料的组成如下:玉米粉45%、植物提取物混合料10%、贝壳粉8%、豆粕15%、发酵蛋壳料10%、鱼粉5%、食盐3%、磷酸氢钙4%;

所述植物提取物混合料按照重量百分数计由以下原料制成:苦丁茶提取物15%、紫藤提取物15%、麦冬提取物18%、乌韭提取物15%、桑果提取物4%、菊苣提取物6%、越桔提取物7%、绞股蓝提取物7%、侧柏叶提取物10%、毛木耳提取物3%;

所述发酵蛋壳料是将废弃蛋壳进行粉碎后,加入婆美度为30的红糖水后发酵10天即可;

所述植物提取物混合料的制备方法为:将上述的提取物按照重量百分数计混合后加入总重量的10%水混合成粘稠物后,加入甜味剂、羟甲基纤维素,甜味剂:羟甲基纤维素:粘稠物按照重量份数比为0.15:0.55:10搅拌均匀后,放入干燥机进行干燥,烘干的同时使用功率为50w、频率为30赫兹超声波进行改性处理,即可得到粉状植物提取物混合料。

进一步说明,所述苦丁茶提取物将新鲜苦丁茶加入5倍体积的水后进行熬煮30分钟,趁热进行过滤,取滤液,将滤液的进行加热浓缩至原体积的1.02倍后停止加热,得到浸膏接着加入纤维素酶、70%(v/v)乙醇溶液进行索氏提取1小时,过滤后将滤液进行减压干燥、粉碎后即可得到苦丁茶提取物,含香树精1.35mg/g、羽扇豆醇1.02mg/g、β-谷甾醇2.63mg/g、苦味质皂苷1.25mg/g;所述浸膏:纤维素酶:乙醇溶液的重量比为5:1:21。

进一步说明,所述紫藤提取物将1kg紫藤种子进行粉碎后,投入超临界co2萃取装置中,萃取3小时,收集提取液,将滤渣加入滤渣质量3倍的70%(v/v)乙醇溶液,进行回流提取20分钟,回流的温度为65℃下,接着以0.1m/s的流速倒入0.3μm陶瓷膜组件进行微滤,在0.12mpa压力差下,依次用截留分子量10000da、5000da的膜组件,以错流方式进行循环超滤处理,得到分子量范围为5000da的紫藤提取物,含双丙酮醇0.36mg/g、β-谷甾醇0.48mg/g、β-胡萝卜苷0.15mg/g、星鱼甾醇0.11mg/g。

进一步说明,所述麦冬提取物是将麦冬经过研磨成粉后加入粉末重量3倍的60%(v/v)乙醇溶液进行回流提取3次,每次20分钟,过滤后放置蒸发皿中水浴蒸干,接着进行减压干燥至原体积的1.01倍,加入含有1%乙酸溶液的70%(v/v)乙醇溶液进行定容后,以流速为0.11m/s的速度进行孔径为0.5μm的微孔滤膜进行过滤,即可得到麦冬提取物,含麦冬皂苷2.02mg/g。

进一步说明,所述乌韭提取物将新鲜乌韭全草除杂后加入3倍体积的蒸馏水进行均质打浆,接着加入溶媒进行提取1小时,接着进行微滤截留分子量为1000da的活性物质,将截留液在转速为2000r/min的分离机中进行分离3分钟,取上清液喷雾干燥后即可得到乌韭提取物,得到的物质中含有β-谷甾醇1.62mg/g、糖苷1.58mg/g。

进一步说明,所述桑果提取物将桑果全草加入2倍体积的水于搅拌机中进行搅拌成浆,接着加入3倍水搅拌均匀后进行水浴提取30分钟,过滤得到粗液,将粗液以0.1m/s的流速倒入聚酰胺层析柱经常层析,使用70%(v/v)乙醇溶液进行3次洗脱,洗脱的压力依次为-0.1mpa、0.1mpa、0.2mpa、洗脱的温度为60℃,接着进行过滤,减压浓缩、干燥、粉碎后得到桑果提取物,含鞣酸1.13mg/g、花青素2.31mg/g。

进一步说明,所述菊苣提取物将菊苣的花捣碎后加入5倍体积的水进行水浴提取20分钟,提取过程使用频率为200赫兹的微波进行辅助提取,过滤后进行减压浓缩至原体积的1.02倍即可,加入20%(v/v)甲醇溶液进行3次洗脱,洗脱的压力依次为-0.1mpa、0.1mpa、0.2mpa、洗脱的温度为60℃,接着进行三层纱布过滤、减压浓缩后得到菊苣提取物,含生物碱5.10mg/g。

进一步说明,所述越桔提取物将越桔放入搅拌机进行搅拌粉碎,接着使用65%(v/v)乙醇溶液于温度为-5℃下进行醇提过夜,隔夜后采用转速为300r/min的离心机进行离心分离过滤得到粗液,将粗液与蛋白酶混合后常温提取1小时,过滤得到越桔提取物,含花色苷0.69mg/g、熊果苷0.69mg/g;

进一步说明,所述侧柏叶提取物将侧柏叶进行粉碎后得到加入70%(v/v)乙醇溶液进行循环提取得到提取液,将提取液加入盐酸调节ph为2.0,接着边搅拌边水浴加热直至提取液中出现丝状物开始计时继续搅拌5分钟,及时过滤取滤液,滤渣重复上述提取步骤2次,将3次的滤液合并进行减压干燥、粉碎后即可得到侧柏叶提取物,含有黄酮0.69mg/g、萜类物质0.74mg/g、鞣质0.65mg/g;

所述毛木耳提取物将毛木耳进行干燥后,加入5倍体积的70%(v/v)乙醇溶液使用索氏提取器后进行索氏提取2小时,过滤取滤液加入滤液总质量的0.01%的壳聚糖溶液后搅拌直至滤液澄清,过滤去滤液进行加热浓缩,冷冻干燥即可得到毛木耳提取物含毛木耳多糖115.26mg/g。

进一步说明,所述甜味剂为木糖醇。

经过上述方法饲养的绿壳蛋鸡病害率为1.2%。

实施例2

对于在3周龄的绿壳蛋鸡,按照如下质量百分数计的原料配置得到的饲料进行饲喂,3次/天,且每次300g/只,且由其自由采食至吃饱为止;

所述饲料的组成如下:玉米粉55%、植物提取物混合料5%、贝壳粉15%、豆粕10%、发酵蛋壳料9%、鱼粉3%、食盐1%、磷酸氢钙2%;

所述发酵蛋壳料是将废弃蛋壳进行粉碎后,加入婆美度为45的红糖水后发酵20天即可;

所述植物提取物混合料按照重量百分数计由以下原料制成:苦丁茶提取物20%、紫藤提取物8%、麦冬提取物10%、乌韭提取物10%、桑果提取物9%、菊苣提取物13%、越桔提取物12%、绞股蓝提取物12%、侧柏叶提取物3%、毛木耳提取物5%;

所述植物提取物混合料的制备方法为:将上述的提取物按照重量百分数计混合后加入总重量的30%水混合成粘稠物后,加入甜味剂、羟甲基纤维素,甜味剂:羟甲基纤维素:粘稠物按照重量份数比为0.23:0.65:12搅拌均匀后,放入干燥机进行干燥,烘干的同时使用功率为80w、频率为50赫兹超声波进行改性处理,即可得到粉状植物提取物混合料。

进一步说明,所述苦丁茶提取物将新鲜苦丁茶加入10倍体积的水后进行熬煮40分钟,趁热进行过滤,取滤液,将滤液的进行加热浓缩至原体积的1.02倍后停止加热,得到浸膏接着加入纤维素酶、80%(v/v)乙醇溶液进行索氏提取2小时,过滤后将滤液进行减压干燥、粉碎后即可得到苦丁茶提取物,含香树精2.64mg/g、羽扇豆醇2.64mg/g、β-谷甾醇5.24mg/g、苦味质皂苷2.64mg/g;所述浸膏:纤维素酶:乙醇溶液的重量比为10:2:31。

进一步说明,所述紫藤提取物将1kg紫藤种子进行粉碎后,投入超临界co2萃取装置中,萃取4小时,收集提取液,将滤渣加入滤渣质量5倍的80%(v/v)乙醇溶液,进行回流提取30分钟,回流的温度为85℃下,接着以0.2m/s的流速倒入0.3μm陶瓷膜组件进行微滤,在0.1mpa压力差下,依次用截留分子量10000da、5000da的膜组件,以错流方式进行循环超滤处理,得到分子量范围为6000da的紫藤提取物,含双丙酮醇0.56mg/g、β-谷甾醇1.12mg/g、β-胡萝卜苷0.23mg/g、星鱼甾醇0.24mg/g。

进一步说明,所述麦冬提取物是将麦冬经过研磨成粉后加入粉末重量5倍的80%(v/v)乙醇溶液进行回流提取3次,每次20分钟,过滤后放置蒸发皿中水浴蒸干,接着进行减压干燥至原体积的1.01倍,加入含有2%乙酸溶液的80%(v/v)乙醇溶液进行定容后,以流速为0.2m/s的速度进行孔径为0.8μm的微孔滤膜进行过滤,即可得到麦冬提取物,含麦冬皂苷4.36mg/g。

进一步说明,所述乌韭提取物将新鲜乌韭全草除杂后加入5倍体积的蒸馏水进行均质打浆,接着加入溶媒进行提取3小时,接着进行微滤截留分子量为2000da的活性物质,将截留液在转速为3000r/min的分离机中进行分离5分钟,取上清液喷雾干燥后即可得到乌韭提取物,得到的物质中含有β-谷甾醇4.32mg/g、糖苷4.30mg/g。

进一步说明,所述桑果提取物将桑果全草加入3倍体积的水于搅拌机中进行搅拌成浆,接着加入5倍水搅拌均匀后进行水浴提取60分钟,过滤得到粗液,将粗液以0.2m/s的流速倒入聚酰胺层析柱经常层析,使用80%(v/v)乙醇溶液进行3次洗脱,洗脱的压力依次为-0.1mpa、0.1mpa、0.2mpa、洗脱的温度为70℃,接着进行过滤,减压浓缩、干燥、粉碎后得到桑果提取物,含鞣酸2.35mg/g、花青素3.24mg/g。

进一步说明,所述菊苣提取物将菊苣的花捣碎后加入10倍体积的水进行水浴提取30分钟,提取过程使用频率为300赫兹的微波进行辅助提取,过滤后进行减压浓缩至原体积的1.02倍即可,加入30%(v/v)甲醇溶液进行3次洗脱,洗脱的压力依次为-0.1mpa、0.1mpa、0.2mpa、洗脱的温度为70℃,接着进行三层纱布过滤、减压浓缩后得到菊苣提取物,含生物碱8.25mg/g。

进一步说明,所述越桔提取物将越桔放入搅拌机进行搅拌粉碎,接着使用75%(v/v)乙醇溶液于温度为-3℃下进行醇提过夜,隔夜后采用转速为400r/min的离心机进行离心分离过滤得到粗液,将粗液与蛋白酶混合后常温提取3小时,过滤得到越桔提取物,含花色苷2.15mg/g、熊果苷1.36mg/g;

进一步说明,所述侧柏叶提取物将侧柏叶进行粉碎后得到加入80%(v/v)乙醇溶液进行循环提取得到提取液,将提取液加入盐酸调节ph为3.0,接着边搅拌边水浴加热直至提取液中出现丝状物开始计时继续搅拌10分钟,及时过滤取滤液,滤渣重复上述提取步骤2次,将3次的滤液合并进行减压干燥、粉碎后即可得到侧柏叶提取物,含有黄酮2.01mg/g、萜类物质1.96mg/g、鞣质1.25mg/g;

所述毛木耳提取物将毛木耳进行干燥后,加入10倍体积的80%(v/v)乙醇溶液使用索氏提取器后进行索氏提取3小时,过滤取滤液加入滤液总质量的0.02%的壳聚糖溶液后搅拌直至滤液澄清,过滤去滤液进行加热浓缩,冷冻干燥即可得到毛木耳提取物,含毛木耳多糖157.36mg/g。

进一步说明,所述甜味剂为低聚异麦芽糖。

经过上述方法饲养的绿壳蛋鸡病害率为1.6%。

实施例3

对于在3周龄的绿壳蛋鸡,按照如下质量百分数计的原料配置得到的饲料进行饲喂,3次/天,且每次200g/只,且由其自由采食至吃饱为止;

所述饲料的组成如下:玉米粉52%、植物提取物混合料9%、贝壳粉12%、豆粕13%、发酵蛋壳料5%、鱼粉4%、食盐2%、磷酸氢钙3%;

所述发酵蛋壳料是将废弃蛋壳进行粉碎后,加入婆美度为35的红糖水后发酵15天即可;

所述植物提取物混合料按照重量百分数计由以下原料制成:苦丁茶提取物17%、紫藤提取物12%、麦冬提取物13%、乌韭提取物12%、桑果提取物6%、菊苣提取物10%、越桔提取物10%、绞股蓝提取物10%、侧柏叶提取物6%、毛木耳提取物4%;

所述植物提取物混合料的制备方法为:将上述的提取物按照重量百分数计混合后加入总重量的20%水混合成粘稠物后,加入甜味剂、羟甲基纤维素,甜味剂:羟甲基纤维素:粘稠物按照重量份数比为0.2:0.6:11搅拌均匀后,放入干燥机进行干燥,烘干的同时使用功率为70w、频率为40赫兹超声波进行改性处理,即可得到粉状植物提取物混合料。

进一步说明,所述苦丁茶提取物将新鲜苦丁茶加入7倍体积的水后进行熬煮35分钟,趁热进行过滤,取滤液,将滤液的进行加热浓缩至原体积的1.02倍后停止加热,得到浸膏接着加入纤维素酶、75%(v/v)乙醇溶液进行索氏提取1.2小时,过滤后将滤液进行减压干燥、粉碎后即可得到苦丁茶提取物,含香树精1.96mg/g、羽扇豆醇1.97mg/g、β-谷甾醇4.02mg/g、苦味质皂苷2.04mg/g;所述浸膏:纤维素酶:乙醇溶液的重量比为7:1:15。

进一步说明,所述紫藤提取物将1kg紫藤种子进行粉碎后,投入超临界co2萃取装置中,萃取3.5小时,收集提取液,将滤渣加入滤渣质量4倍的75%(v/v)乙醇溶液,进行回流提取26分钟,回流的温度为70℃下,接着以0.12m/s的流速倒入0.3μm陶瓷膜组件进行微滤,在0.2mpa压力差下,依次用截留分子量10000da、5000da的膜组件,以错流方式进行循环超滤处理,得到分子量范围为5500da的紫藤提取物,含双丙酮醇0.42mg/g、β-谷甾醇1.04mg/g、β-胡萝卜苷0.19mg/g、星鱼甾醇0.18mg/g。

进一步说明,所述麦冬提取物是将麦冬经过研磨成粉后加入粉末重量4倍的71%(v/v)乙醇溶液进行回流提取3次,每次20分钟,过滤后放置蒸发皿中水浴蒸干,接着进行减压干燥至原体积的1.01倍,加入含有1.2%乙酸溶液的75%(v/v)乙醇溶液进行定容后,以流速为0.15m/s的速度进行孔径为0.6μm的微孔滤膜进行过滤,即可得到麦冬提取物,含麦冬皂苷3.15mg/g。

进一步说明,所述乌韭提取物将新鲜乌韭全草除杂后加入4倍体积的蒸馏水进行均质打浆,接着加入溶媒进行提取2小时,接着进行微滤截留分子量为1500da的活性物质,将截留液在转速为2500r/min的分离机中进行分离4分钟,取上清液喷雾干燥后即可得到乌韭提取物,得到的物质中含有β-谷甾醇2.35mg/g、糖苷3.21mg/g。

进一步说明,所述桑果提取物将桑果全草加入2.5倍体积的水于搅拌机中进行搅拌成浆,接着加入4倍水搅拌均匀后进行水浴提取50分钟,过滤得到粗液,将粗液以0.2m/s的流速倒入聚酰胺层析柱经常层析,使用75%(v/v)乙醇溶液进行3次洗脱,洗脱的压力依次为-0.1mpa、0.1mpa、0.2mpa、洗脱的温度为65℃,接着进行过滤,减压浓缩、干燥、粉碎后得到桑果提取物,含鞣酸2.04mg/g、花青素2.82mg/g。

进一步说明,所述菊苣提取物将菊苣的花捣碎后加入7倍体积的水进行水浴提取25分钟,提取过程使用频率为250赫兹的微波进行辅助提取,过滤后进行减压浓缩至原体积的1.02倍即可,加入25%(v/v)甲醇溶液进行3次洗脱,洗脱的压力依次为-0.1mpa、0.1mpa、0.2mpa、洗脱的温度为65℃,接着进行三层纱布过滤、减压浓缩后得到菊苣提取物,含生物碱7.12mg/g。

进一步说明,所述越桔提取物将越桔放入搅拌机进行搅拌粉碎,接着使用70%(v/v)乙醇溶液于温度为-4℃下进行醇提过夜,隔夜后采用转速为385r/min的离心机进行离心分离过滤得到粗液,将粗液与蛋白酶混合后常温提取2小时,过滤得到越桔提取物,含花色苷1.15mg/g、熊果苷0.97mg/g;

进一步说明,所述侧柏叶提取物将侧柏叶进行粉碎后得到加入75%(v/v)乙醇溶液进行循环提取得到提取液,将提取液加入盐酸调节ph为2.2,接着边搅拌边水浴加热直至提取液中出现丝状物开始计时继续搅拌8分钟,及时过滤取滤液,滤渣重复上述提取步骤2次,将3次的滤液合并进行减压干燥、粉碎后即可得到侧柏叶提取物,含有黄酮1.35mg/g、萜类物质1.08mg/g、鞣质11.1mg/g;

所述毛木耳提取物将毛木耳进行干燥后,加8倍体积的75%(v/v)乙醇溶液使用索氏提取器后进行索氏提取2.5小时,过滤取滤液加入滤液总质量的0.015%的壳聚糖溶液后搅拌直至滤液澄清,过滤去滤液进行加热浓缩,冷冻干燥即可得到毛木耳提取物,含毛木耳多糖147.25mg/g。

经过上述方法饲养的绿壳蛋鸡病害率为2.2%。

试验一:

动物实验:

1.实验材料与方法

1.1实验对象

1.1.1样品处理

供试样品将是1-3的制备的植物提取物混合料溶于蒸馏水中,稀释不同浓度,实验时用生理食盐将样品配制成各剂量。

1.1.2实验动物及检测环境条件

实验用wistar大鼠,雄性,健康清洁级,体重200-250g,共100只,均由广西医科大学实验动物中心提供。检测环境条件,温度范围20-25℃,相对湿度范围50-70%,大鼠在试验前在动物房适应一周。

1.2仪器及试剂

离心机

1.2.2试剂

胆固醇、胆盐、血清总胆固醇(tc)、甘油三酯(tg)、高密度脂蛋白(hdl-c)测定试剂盒。试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。

1.3高脂饲料配方

75%基础饲料、4%胆固醇、10%蛋黄粉、10%猪油、1%胆盐。

1.5实验步骤

脂代谢紊乱模型法—预防性给受试样品

1.6实验数据统计

采用spss19.0和sigmaplot11.0软件进行数据汇总与分析。

2实验结果

2.1辅助降血脂植物提取物混合料对大鼠体重的影响

表1辅助降血脂植物提取物混合料对大鼠体重的影响

由表1可见,大鼠给受试物前(0d),各组体重没有显著差异。给受试物一定时期(7d、14d、21d、28d)后,与高脂对照组相比,其余各组体重均未出现显著差异(p>0.05)。表明该辅助降血脂植物提取物混合料对大鼠生长发育没有不良影响。

2.2辅助降血脂植物提取物混合料对大鼠血清总胆固醇(tc)含量的影响

表2辅助降血脂植物提取物混合料对大鼠血清总胆固醇(tc)含量的影响

由表2可见,大鼠给予受试物前(0d),各实验组血清总胆固醇(tc)含量与高脂对照组比较无显著性差异(p>0.05)。给受试物一定时期(7d、14d、21d、28d)后,各时期高脂对照组与给受试物之前比较,血清tc升高,差异有极显著性(p<0.01),表明高tc模型建立成功。与高脂对照组比较,其余各剂量组均显著降低(p<0.05)。表明该辅助降血脂植物提取物混合料具有降低血清总胆固醇(tc)含量的作用。

2.3辅助降血脂植物提取物混合料对大鼠血清甘油三酯(tg)含量的影响

表3辅助降血脂植物提取物混合料对大鼠血清甘油三酯(tg)含量的影响

由表3可见,大鼠给予受试物前(0d),各实验组血清甘油三脂(tg)含量与高脂对照组比较无显著性差异(p>0.05)。给受试物一定时期(7d、14d、21d、28d)后,各时期高脂对照组与给受试物之前比较,血清tg升高,差异有极显著性(p<0.01),表明高tg模型建立成功。与高脂对照组比较,其余各剂量组均显著降低(p<0.05)。表明该辅助降血脂植物提取物混合料具有降低血清甘油三脂(tg)含量的作用。

2.4辅助降血脂植物提取物混合料对大鼠高密度脂蛋白(hdl-c)含量的影响

表4辅助降血脂植物提取物混合料对大鼠高密度脂蛋白(hdl-c)含量的影响

由表4可见,给予受试物前(0d),各实验组高密度脂蛋白(hdl)含量与高脂对照组比较无显著性差异(p>0.05)。给受试物一定时期(7d、14d、21d、28d)后,各时期高脂对照组与给受试物之前比较,高密度脂蛋白(hdl)含量升高,差异有极显著性(p<0.01),表明高hdl-c模型建立成功。与高脂对照组比较,其余各剂量组均显著降低(p<0.05)。说明表明该辅助降血脂植物提取物混合料具有增加高密度脂蛋白(hdl)含量的作用。

根据《保健食品功能学评价程序与检验方法》对辅助降血脂保健食品的判定标准(动物实验结果判定)对辅助降血脂功能结果判定:在血清总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇三项指标检测中血清总胆固醇和甘油三酯二项指标阳性,可判定该受试样品辅助降血脂功能动物实验结果阳性。

上述说明是针对本发明较佳可行实施例的详细说明,但实施例并非用以限定本发明的专利申请范围,凡本发明所提示的技术精神下所完成的同等变化或修饰变更,均应属于本发明所涵盖专利范围。

THE END
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