这次我们发起这个课堂，一个是希望能够让大家更多了解沼泽红假单胞菌，二是发扬水产人互帮互助精神，多多支持高先富同学，课后周老师已表示将打赏部分全部捐赠给高先富，目前款项已经转达！
今晚我们将以图片+讲解的方式进行交流。
感谢水产前沿，感谢中国水产频道，感谢主持人以及各位同仁们给我这次机会和大家进行交流。
先说一下小高（高先富），小高是2015年11月份到武汉参加我们华中农业大学和我们公司共同举办的渔药、鱼肥、饲料销售人员的培训班，我们在一个班上认识的，他很好学也很敬业，这次不幸查出了白血病，当天我知道后给他捐了2000块钱，也鼓励他挺过去。但是目前还远远不够，也希望各位同仁们能够继续帮他。
这期讲讲水产养殖业常用活菌制剂简易扩培技术及应用原理这个专题。首先讲讲沼泽红假单胞菌，它属于光合细菌。
一、沼泽红假单胞菌简介：
市场上常用的光合细菌实际上有很多种，从微生物学的角度上讲，光和细菌是一大类能够进行光合作用的原核生物的总称。它分为产氧的光合细菌和不产氧的光合细菌两大类。
我们从微生物学的分类角度上把产氧的光合细菌（主要是蓝细菌）或者称之为蓝藻和原绿藻在分类学上是属于藻类的，也就是讲在微生物的领域里面有一部分的藻类也被划分为微生物了，这和水产的浮游植物和浮游动物是有区别的。
我们这里所说的光合细菌是指能够在厌氧光照条件下进行不产氧的光合作用的原核生物。通常来讲分为4个科，红螺菌科、着色菌科、绿菌科、区绿菌科，主要特征含有光和色素，叫菌绿素，能够在厌氧光照条件下进行光合生长而且不产氧。
目前在市场上见到的光和细菌的剂型大约有这么几种，量最大的是液体制剂，有液体的浓缩液，还有固体制剂，还有冻干粉，相对而言液体制剂容易批量的培养、批量的生产，培养物的活性较强，也就是说液态的光合菌的活性会强于固体。
光合细菌的代谢产物非常多，含量也很丰富，应用的效果也非常好。目前在各种剂型当中，液态的是使用量最大的一种。
我们目前应用在水产养殖业中的光合细菌主要是光能异养型的红螺菌科中的一些品种，所以目前我们看到的光和细菌无论是哪个厂家生产的，主要以红色的为主，我们这里主要介绍的是沼泽红假单胞菌，根据农业部1126号公告，2008年发的公告，准许沼泽红假单胞菌以饲料添加剂的方式适用于养殖动物。
我们说的沼泽红假单胞菌，它的名字比较绕口，我解释一下，它首先是一个假的单胞菌，然后它的颜色是红色的，另外一个它最初是在沼泽地的水源地发现的，所以科学家就以沼泽红假单胞菌命名了。它的适宜的生长水温是15-40℃，指的是适宜水温，并不是说它的上限或下限，最适宜的水温是30-36℃。它属于兼性厌氧菌，属于革兰氏阴性菌，它以小分子有机物、二氧化碳等作为碳源，以氨、氨盐、亚硝酸、硝酸盐作为氮源。
沼泽红假单胞菌最开始是用在污水处理上，我们目前把它用在畜禽养殖和水产养殖业上，效果也是相当不错。
简单介绍一下农业微生物学国家重点实验室，它是科技部2003年12月正式批准立项建设的8个国家重点实验室之一。目前以农业有益微生物的利用和有害微生物的防治为主要的研究内容，它的主要作用是选种、保种、育种。
三、沼泽红假单胞菌污水处理的案例
我们接下来来看一下生产沼泽红假单胞菌后用于污水处理的案例。大家可以看得到在这个案例上的是黄孝河，大家看到课件上的两张图片，左边的一张是地上放了很多红色的用5L的瓶子装的菌液（刚刚生产出来），右边一张是黑臭的，基本无氧的污水河，这是生活污水，不管是表层还是底层溶氧基本为零，污染程度非常严重的，在这种环境下，通过曝气来氧化一部分有机物质，另外通过滴灌从天亮开始一直滴到天黑，并把沼泽红假单胞菌投入到污水当中。
在武汉机场河的臭水沟当中也运用到了沼泽红假单胞菌，也是通过水体的曝气，加上天亮之后，天黑之前沼泽红假单胞菌的投放结合起来来处理这个臭味，主要是把臭味消掉。
在污水处理的过程当中，我们大家可以借鉴一下，我们是每天连续大量的在污染水体当中投放沼泽红假单胞菌，消耗大量的氮、磷等营养因子，一定程度上也会抑制浮游植物的生长，因为它可能会起到一定的竞争作用。刚才我们说它的代谢产物又会使浮游植物利用它的代谢产物来生长，这个要看你投多少，水产养殖业当中不可能像处理污水一样，每天投的沼泽红假单胞菌的量那是完全不一样的，因为处理生活污水和有机废水是天天投，几乎是水产养殖的几十倍甚至上百倍，并且这个成本是不计的，而我们的水产养殖业可能是多少天才投一次，所以这个量不可同日而语。
四、沼泽红假单胞菌在水产养殖中的主要作用
首先它消除臭味的物质直接的吃掉氨氮、硫化氢，当然还有很多种。我们说的吃掉大家可以这样去理解，这就是一种通俗的理解方式。之前我们说过了它对氨、氨盐、亚硝酸盐、硝酸盐都可以把它利用掉，所以它可以间接或直接减少一部分亚硝酸盐的产生。另外通过进水的作用，它还可以间接的产生增氧的效果。这个增氧的效果是如何产生的呢？因为它消耗掉了很多物质之后，能够提供代谢产物，又能让浮游植物间接的大量繁殖，而浮游植物产生氧气，所以我们叫间接的增氧，它本身是不产氧也不耗养的。
另外一点显著的降低BOD和COD，这也是污水处理过程中大量使用的原因。
它有一个显著的特征，就是当你打开盖子的时候独特的气味就是一股尿骚味，非常像厕所里面的尿骚味。
菌体的蛋白质含量可达到60%以上，拌料内服可以作为养殖动物的优良蛋白源，但是我们通常不建议大家用这个菌拌料内服，因为蛋白源很容易获得，而且沼泽红假单胞菌独特的气味可能会导致饲料的适口性下降。
防控蓝藻水华
它还有一个功能就是抑制蓝藻水华，这个是在实践当中摸索出来的。原本我们没有意识到沼泽红假单胞菌和蓝藻之间能够产生一个什么样的竞争，到目前为止仍然也不能够完全说清楚他们之间的关系到底是如何，竞争到底是如何发生的？因为我们没用办法做一个这样的实验，目前还不能够得到一个准确的数据，但是通过实践当中大量的例子它可以抑制蓝藻水华。我们在蓝藻水华发生的初期，不是盛行的时候，刚刚发现一个角，比如十亩的水面可能发现下风处几十个平方有蓝藻的聚集。这时我们使用这个菌和过磷酸钙10-20公斤一亩水面，它能够有效的抑制蓝藻的数量，不让它继续上升，但并不是说把蓝藻杀死掉了，而只是说不让它继续发展成为更厉害的水华，所以应该准确的说形成了一定得生物竞争。
但我们不能寄希望于使用一次就能够成功，而且投入磷肥一定要是水溶性高的，如果水溶性不够高的话或者你投入的过磷酸钙当中可溶性磷比较低的话，那么这个办法成功的几率可能比较低，所以大家以后在使用过磷酸钙过程当中，也要搞清楚你拿到的过磷酸钙产品它的可溶性磷到底有多高，而不是看含磷14%、16%还是12%，要去检测一下可溶性磷有多高。
五、沼泽红假单胞菌的正确使用
1、使用前是否需要“激活”？
我们再来聊一聊沼泽红假单胞菌它的正确使用，首先使用前是不是需要激活，这个问题，通常来讲，因为我们的包装，外面都有包装箱，然后里面才是透明的瓶子，瓶子里面装的是菌液，我们生产好之后菌液的浓度基本上在13个亿左右。13个亿是什么意思呢？13亿个每毫升，一个毫升里面有13亿个沼泽红假单胞菌，就是这个意思。
可能有人会问能不能做到更高？我只能这样回答你：我们曾经做到过超过30亿个每毫升的级别，但是这个非常困难，基本上到顶了。为什么呢，因为所有的微生物都是有体积，虽然我们的肉眼看不到，但是它仍然有体积。因此在有体积的前提下，它就一定会占空间，所以我们不可能把任意一种菌做到一个任意的浓度，说它的浓度要提高多少多少倍，这个是有难度的。当然每个菌的菌体大小不一样，它所获得的空间是不同。大家可以想象一下，同一个空间当中，能够站得多少。就像一个房间只能进1000人，你现在硬要塞2000人进去，那是塞不进去的，上限就是1000个作为，它只有1000个座位。
所以我们在做活菌制剂的时候要记住，由于它要活下来它就必须要有空间和食物。所以在这两个条件满足情况下，我们才有可能保存它的活性。养殖户要用之前最好是先激活一下，比如明天早上要用，今天拿到菌后将菌拿到阳光下晒上一天或者几个小时，这个也是我们所说的沼泽红假单胞菌这一类的光合细菌我们用之前去晒一下算是激活。
3、阴雨天能不能使用？
第三给问题阴雨天能不能用？实际上阴雨天也是有光照的，阴雨天也是能用的，只是说由于光照相对晴天来说比较弱，菌的功能相对来说得到的效果会比晴天会差一点，但是你非用不可的情况下你也可以用，所以阴雨天依然是可以用得。
但是大家注意，不管是阴雨天还是晴天，我们都必须注意一点，在有浮头现象发生的时候不能用，因为这个时候你去用，虽然不产养也不耗养，但是浮头到底是什么原因引起的，到底有多严重，或者说是不是有毒物质造成的，最后你都会因为用了某种药物或者咱们的菌，但是人家的浮头更严重，其实跟用这个菌可能没有直接的关系，但是人家可能会找你扯皮，所以有浮头现象的时候是严禁使用的。
4、按照水面计算还是按照水体计算？
另外一个用光合细菌这一类的产品到底是应该按照水面计算还是按照水体计算？我们给出一个准确的说法，按水面计算。
为什么呢？你的面积有多大，我们就按水面来计算，原因很简单，水深1米，超过1米的部分可能光照就很弱，再深你说2米3米或者更深的地方我们人眼能感受的光照可能就没有了，这是在我们的养殖水体里面。但如果在海水里面就不一样了，可能清澈见底，所以在无光或者光线很弱的情况下我们计算水体投放多少光合细菌这样的意义是不大的。
5、防控蓝藻水华时如何使用？
防控蓝藻，我们刚才提前讲了一下，蓝藻水华非常旺盛的时候，整个池塘蓝藻水华都已经铺到整个面上了都有了或者至少有一半都有了，这个情况下再用沼泽红假单胞菌再去和它生物竞争，成功的几率就非常低了，因此我们说的防控蓝藻是在蓝藻水华发生的初期。
六、沼泽红假单胞菌的一级扩培、二级扩培方法
1、生产所需设备：
我们再来看一下生产沼泽红假单胞菌所需的设备，大家从课件上应可以看到，容积60L的白色塑料桶、漏斗、塑料勺这是用来一级扩培的。
二级扩培需要容积一吨的塑料罐，白色的半透明的最好，因为你可以看见里面装了多少水还剩了多少，第三个需要搅拌的潜水泵，这个潜水泵把容易沉到水底的培养基把它搅拌均匀，让整个罐子里面都比较均匀的状况下，和我们的菌种也要均匀的混在一起主要起这个作用。还要有容积5L或者你有更大20L的塑料瓶也是可以的。
2、一级扩培
大家可以看一下课件里面关于菌种及定向培养这张照片，这个照片上很明显有两瓶菌种，一瓶是5L，一共是10L。我们做一级扩培菌种的时候首先是把10升的菌种和2个白色的小袋子，加上1号（有一瓶黄色的液体），加上牛肉膏，把1/10的牛肉膏也就是100g（这个罐子是1公斤），和2小袋500克的固体培养基，加上1号瓶黄色液体把它和100公斤的自来水搅拌均匀（要完全溶解），然后把我们的菌种加进去，再分装。
也可以用井水，但是井水需要升温，因为井水在夏天的时候温度比较低，用井水的地区最好是把井水头一天灌装到罐子里面，自然的升温，升温之后再来作为我们的需要的生成用水来使用。
每天要摇动一次，防止活菌的沉淀。
3、二级扩培：
一级扩培做成功之后，我们得到了和之前2瓶一样的20瓶一级扩培的成品，一级扩培的20瓶成品我们拿它做菌种，再和2袋子5公斤白色的固体培养基加上2号的黄色液体，加上剩下的900克牛肉膏，又把他们和自来水混合均匀，配成一吨的菌液之后再来生产二级扩培。
二级扩培和一级扩培的注意事项是一样的，总之大家可以采取5L或者20L的瓶子都是可以的，还有一些我看到我们的养殖户用塑料袋放在水面上或者地面上，当然有些塑料袋的透光度比较低，这样得到的菌液不太好，所以我们建议还是用食用油油壶，它完全是透明的，这样有利于培养。
3、罐体内部消毒步骤
具体的操作方法比如说罐体内部的消毒步骤。这个我就不做详细的阐述了因为课件写得很清楚。
七、成品菌液的颜色问题
我先讲一下产品菌液的颜色问题。大家可以看得到，我们给的几张图片。照片上，阴天的状态下，咱们菌液的颜色好像偏暗一些，而在晴天的时候，菌液的颜色就偏红一些，这是属于光线的问题。
1、出现菌液发绿变淡现象的常见原因
那么在培养的过程中还会出现菌液的发绿，或者变淡的现象，常见的原因在我们的课件中很清楚，这里我要说一下。首先菌种的接种量过少，这可能是扩培当中没有搅拌或者搅拌不均匀造成的。你可能有几瓶颜色不对头，其它的都很好了。
导致菌液发绿或者变淡的现象还有其他的原因。跟培养基是有关系的，培养基的投放量过低，你投放少了的或者培养基的营养不全面，缺乏一种或几种或着不足这都会造成，最后长着长着慢慢变绿的现象。
还有如果我们用井水作为水源来生产的话，有一些地区的地下水（就是井水）富含过量的重金属离子太多了，没办法处理，所以作为生产用水也是不合格的，导致菌液出现不是红色而是变成其他颜色，一般是变更或者变黄。
2、出现菌液发黄、发黑现象的主要原因
另外菌液出现发黄、发黑这个情况也是有的，这种情况通常是有些生产者没有按照要求使用原种作为菌种，而是把扩培几次之后的成品作为菌种，把其中一部分他们认为可以的产品作为菌种，结果菌种已经发生了变异，实际上菌种已经衰退了，这样就出现了菌种发黄发黑的现象
另外一个原因水源或环境当中的杂菌杂质过多。
3、沼泽红假单胞菌的使用条件：
这里说一下使用条件，整个扩培已经说得很清楚了，我们的这个使用一般来说，大家记住，任何微生物制剂我们用到水产养殖的水体当中，都希望水温度达到15摄氏度或者以上，天气晴朗时候最适宜，无论是需要光照或者不需要光照的，基本上都是这样一个原则。水体过肥的时候，早中晚水色没有明显变化的水体，底层水有明显腥臭味的时候，出现藻类水华早期症状的时候，就可以视根据情况使用1到2次沼泽红假单胞菌。
为什么要水温达到15℃或者以上，原因很简单，之前在培养的过程当中也是一样的，沼泽红假单胞菌实际上在天然的水体当中也是存在的，但是它的量相对来说比较少，我们可以找到它，但是很难。我们往水里面泼洒沼泽红假单胞菌、芽孢、乳酸菌、EM等所有的微生物制剂，我们泼洒进去它到底起到什么作用？
我这里给大家说一段话：目前我们将各种微生物制剂定期或不定期地投放到养殖水体当中，希望这些外来的微生物菌发挥自生的功能来改良水体的水质和底质，其实包括芽孢杆菌、光和细菌、乳酸菌、EM菌等这些活菌真正能够在养殖水体当中长期大量的的存活、定殖和增殖吗？这个答案是否定的。
实际上当我们把这些产品泼洒到水环境当中之后，活的菌体发挥自身的功能之外，更多的是它们的代谢产物在间接地发挥巨大作用，换句话说，由于我们一次性泼洒的益生菌制剂的总量对于整个水体来说实际上是微乎其微的，因此我们投入的这些菌种只能说是药引子，但是投入这么一点点菌它真的是起了四两拨千斤的作用。
我们投入的这些所谓的菌种，它引发了一系列的水体当中的生物化学反应，从而导致我们肉眼看得见和看不见的水质变化。在这里我跟大家举个例子，中药当中的药引子，大家都知道这个药引子可能就只有一点点，但是他却起到了把其他的药物的作用激发出来的作用，也就是讲我们投入的很多活菌制剂，真正的活菌制剂，包括一部分代谢产物，投入到水体当中去之后他激发了这个水体当中本身就存在的土著微生物的数量上的增殖，品种上的丰富，最后我们会看到浮游植物大量的生长和繁殖，数量会越来越多。或者说我们投入的这些菌提供了其它微生物所需的微量元素或者提供给浮游植物所需要的营养元素，那么它们利用了之后，又使得我们的水体当中的微生态的生物圈品种更加丰富，数量更多，工人越来越多了。我这里解释一下我们说的工人越来越多的意思，我们水产养殖业最后的产品是我们养的那些养殖对象比如鱼虾蟹，我们投入的大量的肥料和饲料以及苗种，这些是我们的原料，而水体当中的原本存在的微生物和浮游植物以及我们后面添加的这些活菌制剂实际上是我们投入的生产工人。
那么我们投入了那么多的原料，如果在这些原料投入之后你不去配相应的各个环节上的生产工人，那么这些原料就不能顺畅地运输到变成我们最终要的生产出来的产品，因此我们把这个概念搞清楚，我们往水里面投微生物的目的是什么，就是去投放在这个整个的生产过程中各个岗位上起各个不同功能功能你们可以理解成为投入的微生物就是工人。
下面我给大家说一下沼泽红假单胞菌目前我们能够生产出来的浓度，大于等于10亿个每毫升，实际上刚刚生产出来的一定是13个亿，但是会在6个月之内累慢慢的减少，过了6个月之后它会迅速的减少。