1、ET-NiVG:NiVF重组载体的诱导表达与NiVG和NiVF蛋白的纯化InducingvectorpET-NiVG:NiVFtoexpressandpurificationoftargetproteinsNiVGandNiVF报告人:导师:研究背景目的及意义实验方法实验结果讨论与结论致谢研究背景尼帕病毒脑炎是一种高度烈性人畜共患传染病。目前我国虽然没有该病爆发,但其已经对我国构成了严重威胁。目的及意义以大肠杆菌OBL21表达重组载体(pET-NiVG:NiVF重组载体),以IPTG作为诱导引物诱导目蛋白的表达,之后对目的蛋白(尼帕病毒粘附
2、蛋白G和融合蛋白F),进行分离及纯化。实验方法pET-NiVG:NiVF重组载体转入感受态工程菌BL21目的基因的诱导表达目的蛋白的提取目的蛋白的鉴定三、目的蛋白的提取用超声处理法破碎细胞,并用尿素反复溶解可溶性的杂质蛋白,以获取较纯净的目的蛋白,并在各个阶段提取纯化样品。四、目的蛋白的鉴定对蛋白样品进行SDS电泳和Western-blot鉴定。实验结果一、诱导表达NiVF蛋白及纯化结果目的蛋白表达并且通过处理后获取较纯净的蛋白实验讨论与结论实验讨论:实验获取的目的蛋白依然含有较多的杂质,如果对纯化后的产物进行过柱处理,特异性的保留目的蛋白,可获取更为纯净的目的蛋白。实验结论:本实验成功的获取了较纯净的目的蛋白,并可用于免疫
THE END